C18柱因不同鍵合方式、粒徑的不同、不同的長(zhǎng)度、內(nèi)徑等因素表現(xiàn)出不同的選擇性。這樣市場(chǎng)上就有數(shù)百種不同選擇特性的C18色譜柱。
對(duì)于傳統(tǒng)的C18柱,pH值使用范圍一般為2~7,因?yàn)閜H值高于8時(shí)C18固定相會(huì)受到限制。由于殘留硅羥基的存在,容易對(duì)堿性化合物造成不可逆的吸附,造成峰尾,影響分離分析。pH如果值太低,鍵合烷基就會(huì)脫落,成分的分離也不能滿足要求。
1.酸性條件下C18柱的選擇
為了改善C18柱在低pH值時(shí)的穩(wěn)定性,有人提出了空間位阻的方法。
空間位阻作用是指連接大基團(tuán),阻礙溶質(zhì)基團(tuán)攻擊硅醇基,使硅氧烷再生,提高化學(xué)鍵固定抗水解能力。
還有人在側(cè)鏈中制備了異丙基或異丁基C18化學(xué)鍵合固定相。由于固定相引入了較大的側(cè)鏈基團(tuán),三維阻礙了殘留硅醇基和溶質(zhì)之間的相互作用,在低中pH這種化學(xué)鍵合固定相更適合酸性物質(zhì)的分離。
2.堿性條件下C18柱的選擇
化學(xué)鍵合相一直是研究的熱點(diǎn)。
每個(gè)硅烷化分子中含有兩個(gè)硅原子,兩個(gè)硅原子之間有兩個(gè)硅原子-O-或-CH2-CH2等基團(tuán)連接,每個(gè)硅原子含有一個(gè)C18官能團(tuán)。其環(huán)狀結(jié)構(gòu)無(wú)論在低位都是低的pH在價(jià)值條件下,還是高的pH穩(wěn)定性高,柱效滿意。
與傳統(tǒng)的單齒化學(xué)鍵合相比,這種化學(xué)鍵合固定相的突出優(yōu)點(diǎn)是低、中、高pH值時(shí)穩(wěn)定性好。C18雙齒化學(xué)鍵合固定相的商品柱有ZorbaxExtend-C18色譜柱,其耐受性pH值達(dá)11.5、特別適合高pH強(qiáng)堿性化合物在流動(dòng)相條件下進(jìn)行有效的色譜分離。