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手性色譜柱使用壽命的幾個(gè)影響因素

欄目:行業(yè)資訊 發(fā)布時(shí)間:2022-11-29
?影響手性色譜柱壽命的幾個(gè)因素主要包括:流動(dòng)相、樣品等因素。在使用色譜柱時(shí),應(yīng)注意這些因素,以有效地提高使用壽命。

影響手性色譜柱壽命的幾個(gè)因素主要包括:流動(dòng)相、樣品等因素。在使用色譜柱時(shí),應(yīng)注意這些因素,以有效地提高使用壽命。


一.流動(dòng)相因素


1.流動(dòng)相pH

不同基質(zhì)的填料有不同的pH適用范圍。常溫下不定形硅膠在純水中的溶解度約為100mg?L-1,且在pH1~9范圍內(nèi)溶解的硅膠量幾乎為常量??紤]到溶解速度的影響,硅膠基質(zhì)填料能承受的流動(dòng)相pH范圍約為1~8。由于鍵合層的屏蔽作用,鍵合相硅膠填料大大提高了填料對(duì)流動(dòng)相的適應(yīng)性。如今,廣泛使用的反相色譜填料C18(十八烷基硅烷鍵合硅膠)pH適用范圍可達(dá)2~10。當(dāng)流動(dòng)相時(shí)。pH當(dāng)值超過(guò)酸性范圍時(shí),鍵合容易水解流失;當(dāng)流相相流動(dòng)時(shí),pH當(dāng)超過(guò)堿范圍時(shí),會(huì)加速硅膠的溶解,釋放絮狀物阻塞柱。這兩種反應(yīng)都是不可逆的,尤其是在高溫下(>40℃)在環(huán)境中,柱效會(huì)迅速降低并報(bào)廢。


2.流動(dòng)相變質(zhì)

目前使用最廣泛的是硅基鍵合相填料。當(dāng)溶液作為流動(dòng)相或流動(dòng)相中含有一定濃度的磷酸鹽緩沖液時(shí),一些細(xì)菌或霉菌會(huì)在溶液或緩沖鹽溶液中生長(zhǎng),從而阻塞固定相顆粒之間的間隙。特別是對(duì)于多自動(dòng)比例混合的高效液相色譜儀,由于儲(chǔ)存時(shí)間長(zhǎng),水相或緩沖鹽相容易單獨(dú)儲(chǔ)存。

手性色譜柱使用壽命的幾個(gè)影響因素

3.流動(dòng)相純度

目前廣泛使用的填料顆粒粒范圍為3~10μm,孔徑在6~10nm,色譜柱在使用過(guò)程中會(huì)有大量的流動(dòng)相通過(guò)。如果流動(dòng)相含有少量不溶性雜質(zhì)顆粒,很容易在柱頭位置被截流。從長(zhǎng)遠(yuǎn)來(lái)看,它會(huì)導(dǎo)致色譜柱反射阻塞,導(dǎo)致柱壓升高,無(wú)法正常使用。


4.其它因素

例如,流動(dòng)相的極性也對(duì)柱有一定的影響,甲醇.水.極性物質(zhì)如冰醋酸會(huì)損壞硅膠填料柱、正丁醇等.二氯甲烷等極小物質(zhì)會(huì)損壞硅膠柱,堿性溶液會(huì)損壞陽(yáng)離子交換樹(shù)脂色譜柱,酸性溶液容易損壞陰離子交換樹(shù)脂柱。


二.樣品因素


1.樣品溶解性

樣品樣品在準(zhǔn)備過(guò)程中,如果少量顆粒未能完全溶解,則會(huì)與樣品一起進(jìn)入色譜柱,也會(huì)沉積在柱頭,導(dǎo)致色譜柱堵塞。


2.樣品純度

樣品中可能含有待分析成分以外的各種成分或雜質(zhì),可能在柱內(nèi)產(chǎn)生不可逆吸附,從而覆蓋固定相的活性點(diǎn),改變保留特性。

手性色譜柱使用壽命的幾個(gè)影響因素

3.樣品的化學(xué)性質(zhì)

待檢測(cè)樣品中的各種成分與填料之間應(yīng)具有化學(xué)穩(wěn)定性。典型的是使用氨基鍵合柱時(shí),應(yīng)避免使用含有堿的化合物和流動(dòng)相,如甲苯.乙酸丁酯等,以防固定相中NH2和酐.酮發(fā)發(fā)希夫(Schiff)固定相因收縮而損壞。


三.影響手性色譜柱產(chǎn)品壽命的其他因素

手性色譜柱使用壽命的影響因素很多,除了流動(dòng)相和樣品因素外,還有其他外部因素,如柱壓、溫度、色譜柱正確清洗、色譜柱正確安裝等。