死體積
在使用液相的過程中,我們一聽到死體積就會(huì)想到:死體積會(huì)導(dǎo)致峰展寬,分離效果自然就會(huì)受到影響了。
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死體積的定義
死體積(Dead Volume,V?):由進(jìn)樣器進(jìn)樣口到檢測(cè)器流動(dòng)池未被固定相所占據(jù)的空間。它包括4部分:進(jìn)樣器至色譜柱管路體積、柱內(nèi)固定相顆粒間隙(被流動(dòng)相占據(jù),Vm)、柱出口管路體積、檢測(cè)器流動(dòng)池體積。其中只有Vm參與色譜平衡過程,其它三個(gè)部分只起峰擴(kuò)展作用。為防止峰擴(kuò)展,這三個(gè)部分體積應(yīng)盡量減小。
死體積的測(cè)定
死體積通常需要通過實(shí)驗(yàn)進(jìn)行測(cè)量,常用方法是通過進(jìn)一針和色譜柱固定相沒有任何作用的樣品(如尿嘧啶)時(shí),就會(huì)得到一個(gè)色譜峰,由此峰可以測(cè)得死時(shí)間(t?)。然后將該值乘以流速(F)換算為體積。
即:死體積(V?) = 死時(shí)間 t?×流動(dòng)相的流速 F
減少死體積的方法
減少死體積的辦法主要包括減少連接管路的長度,縮小連接管路的直徑,用死體積小的檢測(cè)池,用粒度小的色譜填料。
另外在我們使用或維護(hù)的過程中,如果涉及管路等配件的更換,應(yīng)該選擇與原規(guī)格一致的配件,以確保死體積與原來一致,避免死體積的增加而帶來峰形的展寬。接裝色譜柱時(shí),需確保管線接頭匹配完好(特別注意peek管接頭的使用)避免形成接頭空腔(下圖)。
(左圖為peek管接頭)圖片來源于網(wǎng)絡(luò),侵刪