液相色譜柱的儲存液如果沒有特殊說明，通常與評價報告中列出的流動相相同。在使用之前，務必確認儲存液與待分析樣品的流動相是否可以互溶。在反相色譜分析中，若采用高濃度鹽或緩沖液作為洗脫劑，建議先用約10%的低濃度有機相洗脫劑進行過渡，否則緩沖液中的鹽分在高濃度有機溶劑中容易析出，可能導致色譜柱堵塞。

液相色譜柱的柱壓升高可能由以下幾種原因引起。

1、流動相的預處理

雜質(zhì)堵塞了色譜柱的入口濾片，導致壓力上升。這通常是因為流動相沒有經(jīng)過過濾，或者即使經(jīng)過了過濾，但過濾效果不佳，導致固體雜質(zhì)滯留在濾板上。

2、樣品的沉淀

當溶解樣品的溶劑與流動相不匹配時，樣品進入色譜柱時可能會因為溶解度下降而出現(xiàn)沉淀，從而導致壓力增加。

3、晶體的析出

在使用含有緩沖液的流動相時，緩沖液中的無機鹽可能會在系統(tǒng)中留存。由于這些無機鹽在新的流動相中的溶解度降低，它們可能會析出，從而導致流體阻力增大和壓力升高。

4、細菌或霉菌滋生

霉菌會在流動相、管路或柱子入口處滋生，導致濾板堵塞，從而使壓力升高。因此，在使用磷酸鹽緩沖液時，通常需現(xiàn)調(diào)現(xiàn)用。

5、溶質(zhì)吸附

當溶質(zhì)在柱子上的吸附力較強，而所使用的流動相又難以將其洗脫時，未能洗脫的溶質(zhì)積累會導致阻力增大和壓力升高。

6、流動相更換的頻率過于頻繁。

在更換流動相體系時，不同性質(zhì)且互不相溶的流動相同時存在于同一體系中，也會導致壓力增高。

7、壓力脈沖

在運行過程中，有時系統(tǒng)內(nèi)的壓力會出現(xiàn)突然而劇烈的波動。這種壓力脈沖可能導致多孔填料的破裂以及柱床結(jié)構(gòu)的細微變化。此外，填料微顆粒的長期積累也有可能增加柱床的阻力，從而引起壓力的上升。