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破解手性色譜柱難題：從溶劑互溶性入手

欄目：行業(yè)資訊 發(fā)布時間：2024-09-12
在使用手性色譜柱的過程中，溶劑互溶性是一個不應被忽視的重要因素。溶劑互溶性不僅關系到色譜柱的分離效果，還可能直接影響色譜柱的壽命和穩(wěn)定性。

在使用手性色譜柱的過程中，溶劑互溶性是一個不應被忽視的重要因素。溶劑互溶性不僅關系到色譜柱的分離效果，還可能直接影響色譜柱的壽命和穩(wěn)定性。以下是在使用手性色譜柱時需要注意的溶劑互溶性方面的幾個關鍵點：



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溶劑互溶性影響


  • 分離效果：

理想的液體混合物是兩個純液體可按任意比例互溶，通常兩者結構相似或極性相似，但實際上，常用的液相流動相的互溶性會存在偏差，兩溶劑間的相互兼容性越好，它們混合所形成的溶解混合物溶解度指數也就越高，因此溶劑互溶性的好壞直接影響到色譜柱的分離效果。如果流動相與固定相或樣品中的溶劑互溶性不佳，可能會導致色譜峰拖尾、分離度下降等問題。



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    常見溶劑互溶表



      • 色譜柱壽命：

      長期使用與固定相不相容的溶劑，可能會逐漸侵蝕固定相的表面，導致色譜柱的分離性能下降，甚至損壞色譜柱。



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    溶劑選擇


    • 樣品溶解溶劑：

    樣品溶解：樣品一般用合適的流動相溶劑溶解，以避免使用可能破壞手性固定相的溶劑。如果樣品中原本含有強溶劑，應在進樣前進行充分的干燥或置換處理。



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    • 流動相的選擇 

     非極性烷烴和醇類溶劑：對于涂覆型手性固定相，建議使用非極性烷烴（如正己烷）和醇類（如異丙醇或乙醇）作為流動相的主要成分。這些溶劑通常與固定相具有較好的相容性，能夠保持色譜柱的穩(wěn)定性和分離效果。




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    避免強溶劑：涂覆型手性固定相特別敏感于某些強溶劑，如氯仿、二氯甲烷、乙酸乙酯以及丙酮等。這些溶劑可能會溶解或溶脹多糖衍生物等固定相材料，從而破壞固定相的結構和性能。因此，在選擇流動相時，應盡量避免使用這些強溶劑。

    鍵合型色譜柱無溶劑使用限制，如丙酮、氯仿、二甲基甲酰胺、二甲基亞砜、乙酸乙酯、二氯甲烷和四氫呋喃等強溶劑，均可作為溶劑溶解樣品和流動相使用。




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    • pH的調節(jié)

    溶劑和溶質的酸堿性質是決定它們能否互溶的關鍵因素之一。通過調整pH值，可以改變溶劑或溶質的電離狀態(tài)，從而影響其極性和溶解性。在某些情況下，通過調節(jié)流動相的pH值可以改變目標化合物與固定相之間的相互作用力，提高分離效果。例如，在分離氨基酸等兩性化合物時，常采用低pH值的流動相以抑制酸性基團的離子化并增強氨基的質子化。




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    操作建議


    • 樣品處理：

    在進樣前，應對樣品進行充分的預處理，以去除可能干擾分離效果的雜質和溶劑殘留。

    • 溶劑篩選：

    在確定色譜柱和樣品后，應首先進行溶劑篩選實驗，以找到與固定相和樣品均相容的流動相溶劑。這可以通過嘗試不同的溶劑組合和比例來實現。

    • pH調節(jié)：

    在實際操作中，可以通過實驗來驗證不同pH值下溶劑對溶質的溶解效果。通過改變溶劑的pH值并觀察溶質的溶解情況，可以找到最佳的pH值范圍。

    • 定期維護：

    定期對色譜柱進行清洗和維護，以去除可能積累的雜質和殘留溶劑。這有助于保持色譜柱的分離性能和延長其使用壽命。



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    總結

    溶劑互溶性是使用手性色譜柱時需要注意的一個重要因素。通過合理選擇流動相溶劑、pH的調節(jié)以及定期維護色譜柱等措施，可以確保色譜柱的穩(wěn)定性和分離效果。同時，在操作過程中還應注意觀察色譜圖的變化情況，及時發(fā)現并解決問題。