流動相跑空，會對柱子有影響嗎?

欄目：行業(yè)資訊發(fā)布時間：2024-09-23

在實驗室操作中，流動相跑空是一個需要特別關注的問題，如果不及時處理，可能會對實驗設備造成損害，也會對色譜柱造成影響，并影響后續(xù)實驗結(jié)果的準確性。

在實驗室操作中，流動相跑空是一個需要特別關注的問題，如果不及時處理，可能會對實驗設備造成損害，也會對色譜柱造成影響，并影響后續(xù)實驗結(jié)果的準確性。本文將從多個方面探討流動相跑空對色譜柱的影響和具體的處理步驟和建議。

一、對色譜柱的直接影響

氣泡進入色譜柱：當流動相跑空時，泵會吸入空氣，這些氣泡可能會進入色譜柱。雖然HPLC的泵通常設計成不適合長時間輸送氣體，但在泵完全停止之前，一些氣泡可能會進入柱子。氣泡的存在會干擾流動相的流動，導致流速不穩(wěn)定，進而影響色譜分析的準確性和重復性。
溶劑突然減少或中斷：流動相跑空意味著色譜柱內(nèi)的溶劑突然減少或中斷，這會導致樣品在柱內(nèi)的傳質(zhì)過程受到影響。具體來說，樣品可能會在柱內(nèi)滯留時間過長，造成峰形展寬和分辨率降低。此外，樣品與固定相的相互作用也會減弱，導致保留時間縮短和靈敏度下降。
柱子內(nèi)部可能干涸：在極端情況下，如果流動相長時間跑空，色譜柱內(nèi)部可能會干涸。這會導致柱效顯著降低，甚至可能損壞色譜柱。

二、對色譜柱的間接影響

泵和密封墊的損壞：流動相跑空不僅影響色譜柱，還可能對泵和密封墊造成損壞。因為流動相還充當了活塞和密封墊之間的潤滑劑，沒有了流動相的潤滑作用，密封墊很容易磨損。長時間在缺少流動相的情況下運行泵，還可能導致泵內(nèi)部的密封圈損壞，進而影響泵的性能和壽命。
系統(tǒng)壓力異常：流動相跑空后，系統(tǒng)內(nèi)的壓力可能會發(fā)生異常變化。這可能會導致單向閥、泵、柱子和檢測器等部件堵塞或損壞。因此，在重新啟動系統(tǒng)之前，必須仔細檢查并排除這些潛在問題。

三、處理措施

2.排氣和清洗

排氣：使用注射器或其他工具，將泵及管路中的空氣排出。可以打開沖洗閥，以較大的流速（如3-5ml/min）進行排氣，確保系統(tǒng)內(nèi)的氣泡被完全清除。
清洗泵和管路：換上足量的新流動相，通過泵進行循環(huán)清洗，以去除可能殘留的雜質(zhì)和氣泡。

3.檢查并更換密封圈

4.沖洗色譜柱

正相色譜柱：使用正己烷/異丙醇=90/10 以較低的流速（如0.5ml/min）沖洗色譜柱，再更換為目標流動相穩(wěn)定系統(tǒng)至基線平穩(wěn)且確認柱子內(nèi)無氣泡為止。
反相色譜柱：使用純甲醇或純乙腈以較低的流速（如0.5ml/min）進行沖洗，直至基線穩(wěn)定且確認柱子內(nèi)無氣泡為止。這一步驟有助于恢復色譜柱的性能并去除可能殘留的空氣。
逐步增加流速：在確認色譜柱無問題后，可以逐步增加流速至正常分析所需的流速，以確保色譜柱的穩(wěn)定性和分離效果。

5.設置保護參數(shù)

設置最低壓力：在儀器軟件中設置泵運行的最低壓力值。當流動相不足導致壓力下降時，泵將自動停止工作，以保護儀器不受損壞。
監(jiān)控流動相體積：設置溶劑瓶里流動相的實際體積以及最小允許運行的體積。軟件可以根據(jù)流速和時間自動計算溶劑瓶內(nèi)的剩余流動相量，并在到達最小允許運行的體積時自動停止運行。

6.重新進樣實驗