PH范圍色譜柱的基本要求。

①與固定相不相溶，且不會發(fā)生化學(xué)反應(yīng)。

②樣品應(yīng)具有適當?shù)娜芙舛龋髃值處于可接受的范圍內(nèi)。如果溶解度過高，k值會過低，不利于分離；而如果溶解度過低，k值會過高，可能導(dǎo)致樣品在活動相中沉淀。

③必須與檢測器相匹配。例如，使用紫外檢測器時，流動相本身在檢測波段內(nèi)應(yīng)無吸收。

④活動相的粘度要較低，以減少色譜柱的阻力，從而提高柱效。

⑤純度高，不含任何機械雜質(zhì)。

選擇pH范圍色譜柱時需要考慮的因素。

①活動相對填料的性質(zhì)沒有任何影響。但低交聯(lián)度的離子交換樹脂和排阻色譜填料在某些有機相的作用下，可能會發(fā)生膨脹或收縮，從而改變色譜柱填床的特性。堿性活動相不適用于硅膠柱系統(tǒng)，而酸性活動相則不適合用于氧化鋁、氧化鎂等吸附劑的柱系統(tǒng)。

②純度。色譜柱的使用壽命與活性成分的數(shù)量有關(guān)，尤其是當溶劑中的雜質(zhì)在柱內(nèi)積聚時。

③必須與檢測器相匹配。使用紫外線檢測器時，所用的活動相在檢測波長下應(yīng)無吸收或吸收極小。當使用示差折光檢測器時，應(yīng)選擇與樣品折光系數(shù)差異較大的溶劑作為活動相，以提高靈敏度。

④粘度要低。

⑤樣品的溶解度必須合適。如果溶解度不好，樣品可能在柱頭沉淀，這不僅會影響純化和分離的效果，還會導(dǎo)致柱子的性能下降。

⑥樣品容易回收，應(yīng)該選擇揮發(fā)性溶劑。

此外，在選擇色譜柱的pH范圍時，還需特別關(guān)注樣品的酸堿性質(zhì)。不同樣品可能含有酸性或堿性官能團，這些官能團在特定pH條件下可能會解離或發(fā)生質(zhì)子化，從而影響其在色譜柱上的保留行為。因此，選擇與目標樣品酸堿性質(zhì)相兼容的色譜柱尤為重要。

例如，對于含有羧酸基團的酸性樣品，應(yīng)選擇能在中性或弱堿性條件下穩(wěn)定工作的色譜柱，以避免樣品解離導(dǎo)致的峰形拖尾或分離效果不佳。相反，對于堿性樣品，如胺類化合物，則需選擇能在酸性或中性條件下工作的色譜柱，以防止樣品質(zhì)子化影響分離。

此外，色譜柱的耐受性也是選擇時不可忽視的一環(huán)。某些色譜柱可能對極端pH值敏感，長期使用超出其耐受范圍的流動相會導(dǎo)致柱效下降、填料破壞甚至柱體損壞。因此，在選擇色譜柱時，應(yīng)查閱相關(guān)文獻或咨詢供應(yīng)商，了解其推薦的pH使用范圍及長期穩(wěn)定性數(shù)據(jù)。

綜上所述，選擇合適的色譜柱pH范圍不僅關(guān)乎到樣品的分離效果，還直接影響到色譜柱的使用壽命和整體實驗成本。因此，在進行色譜分析前，務(wù)必根據(jù)樣品的性質(zhì)、檢測要求及色譜柱的特性進行綜合考慮，做出科學(xué)合理的選擇。