刷型固定相手性識別原理主要是三點作用原理，要實現(xiàn)對映體與固定相之間至少存在三點相互作用。這些作用可以是氫鍵、靜電作用、偶極-偶極作用、疏水作用或空間作用等，并且其中一點要有立體選擇性。

固定相手性分子中的3個位點A、B、C與被拆分的化合物某一對映體分子中相應的位點A’、B'、C’發(fā)生作用，而與化合物的另一對映體分子至多只能發(fā)生兩點相互作用，由此，兩對映體因與固定相的作用一對映體力不同而被分離。

圖 3 三點作用模式

如圖3所示，當手性固定相與對映體(I)相互作用的部位為 A…A'、B…B’和C…C'，而與對映體(II)缺少C…C’作用部位時，如果C…C'是相互吸引部位,則對映體(I)比)在柱上的保留時間長；如果C…C’是相互排斥部位，則對映體(I)可先被洗脫；如果C…C’之間相互作用極弱或完全沒有作用，則不能被分離。

刷型手性固定相一般采用正相色譜體系，以含一定量異丙醇(0.2%~20%)的正已烷為流動相，有時也采用四氫呋喃和其他氫鍵受體溶劑。這類固定相也可以在反相體系中應用，但大多數(shù)情況下正相體系中的分離效果相對好一些。

刷型手性固定相的優(yōu)點是柱效和柱容量高，不僅用于對映體分析，也可用于對映體制備分離。除了用于常規(guī)HPLC，還可用于超臨界流體色譜(SFC)和模擬移動床色譜(SMB)中?；诹Ⅲw識別機制，該類固定相可預測對映體洗脫順序或改變對映體洗脫順序，這對對映體雜質的檢查分析具有重要的意義。由于該類固定相一般共價鍵合在硅膠表面，所以推薦的流動相pH值范圍在2.5~7.5之間。

圖 4 不同流動相改性試劑對萘普生對映體手性拆分的影響

在選擇流動相條件時，首先以不加改性劑的流動相進行摸索，如果被分離物是酸性或堿性較強的物質，為了改善峰形或提高分離度，可在流動相中加入一些改性劑，如圖 4所示但改性劑的加入量一般不超過0.1%。通常拆分酸性化合物時加入的改性劑為醋酸或醋酸銨，拆分堿性化合物時加入的改性劑是三乙胺、二乙胺或醋酸銨。而需要注意的是，常用的三氟乙酸改性劑在刷型手性固定相中是限制使用的。另外，柱溫對此類手性固定相的拆分性能有較大的影響。

刷型手性固定相在手性化合物的分離中得到了廣泛的應用，它既可以用作反相色譜，也可以用于正相色譜，存在有不足之處，如對于不含芳香環(huán)的化合物，在分離之前要先進行芳香化反應才能進行拆分，這大大限制了這類固定相的應用范圍。

參考文獻：

1.刷型手性固定相及其在手性化合物分離中的應用，周英珍等；