C18反相液相色譜柱的保養(yǎng)與維護(hù)

1.C18反相液相色譜柱的平衡過(guò)程

c18反相液相色譜柱在測(cè)試后應(yīng)儲(chǔ)存在乙腈和水的混合溶液中。新柱使用前需用10-20倍柱體積的甲醇或乙腈進(jìn)行沖洗。務(wù)必確保分析樣品所用的流動(dòng)相與乙腈/水能夠互溶。每天要花足夠的時(shí)間用流動(dòng)相來(lái)平衡c18反相液相色譜柱。

C18反相液相色譜柱的操作步驟如下：

a.在平衡開始時(shí)，逐漸提高流速，用流動(dòng)相對(duì)色譜柱進(jìn)行平衡，直到得到穩(wěn)定的基線（如果緩沖鹽或離子對(duì)試劑的流速較低，平衡所需的時(shí)間可能會(huì)更長(zhǎng)）。

b.如果流動(dòng)相中含有緩沖鹽，則需要注意用純水進(jìn)行過(guò)渡。在每天的分析開始之前，必須先用純水沖洗30分鐘以上，然后再用含緩沖鹽的流動(dòng)相進(jìn)行平衡；分析結(jié)束后，也必須先用純水沖洗30分鐘以上，以去除緩沖鹽，然后再用甲醇沖洗30分鐘，以保護(hù)柱子。

2．C18反相液相色譜柱的恢復(fù)

長(zhǎng)期使用的C18反相液相色譜柱，通常會(huì)導(dǎo)致柱效下降（理論塔板數(shù)減少）?？梢詫?duì)C18反相液相色譜柱進(jìn)行再生，建議在具備條件的實(shí)驗(yàn)室中，使用一臺(tái)經(jīng)濟(jì)實(shí)惠的泵進(jìn)行柱子的再生處理。

具體再生步驟如下：首先，用高濃度的有機(jī)溶劑（如純甲醇或乙腈）以較低流速?zèng)_洗柱子數(shù)小時(shí)，以去除可能積累的雜質(zhì)和污染物。隨后，改用一種溫和的酸性或堿性溶液（如0.1M的磷酸或氫氧化鈉溶液，需根據(jù)柱子耐受性選擇），同樣以低流速?zèng)_洗數(shù)小時(shí)，這一步旨在中和并去除可能吸附在柱子表面的殘留物。完成酸堿處理后，務(wù)必再次用高濃度有機(jī)溶劑沖洗，徹底洗凈酸堿殘留，恢復(fù)柱子至中性環(huán)境。

此外，定期進(jìn)行反向沖洗也是保持柱子性能的有效手段，但需注意不是所有柱子都支持此操作，操作前務(wù)必查閱柱子說(shuō)明書。反向沖洗時(shí)，使用與常規(guī)方向相反的流動(dòng)相，以輕微松動(dòng)并去除柱內(nèi)可能堵塞的顆粒。

最后，每次使用完畢后，除了上述的沖洗步驟，還應(yīng)確保色譜柱內(nèi)充滿適宜的保存溶劑，并存放在陰涼干燥處，避免溫度和濕度的劇烈變化，這些都能有效延長(zhǎng)C18反相液相色譜柱的使用壽命，確保其持續(xù)提供高質(zhì)量的分離效果。