在线观看无码视频,久久久婷婷成人综合激情,亚洲日本乱码中文在线电影 ,欧美亚洲韩国日本黑白陪

破解HPLC色譜峰面積重現(xiàn)性差難題

欄目：行業(yè)資訊 發(fā)布時間：2025-01-02
在使用高效液相（HPLC)色譜系統(tǒng)進行日常分析檢測的過程中，有時會遇到色譜峰峰面積重現(xiàn)性差的問題，導致無法對組分進行準確定量。

在使用高效液相（HPLC)色譜系統(tǒng)進行日常分析檢測的過程中，有時會遇到色譜峰峰面積重現(xiàn)性差的問題，導致無法對組分進行準確定量。

重現(xiàn)性是指不同分析人員或不同實驗室在各自的條件下所得分析結(jié)果的精密度，即使是給到了相同的開發(fā)方法也會有方法不重現(xiàn)的時候，這是什么原因呢？可以從色譜柱、儀器系統(tǒng)、方法本身的穩(wěn)定性這三方面去排查。

01
色譜柱問題的排查

首先檢查色譜柱的性能是否完好，觀察色譜峰形和柱效變化情況，確認色譜柱是否被污染。如果色譜柱被污染，可以使用更強的洗脫溶劑沖洗色譜柱。


如果是由于更換色譜柱導致方法不能重現(xiàn)，那么就是色譜柱間的差異問題，同一種鍵合相，不同廠家的會不一樣，同一廠家的也有很多款，即使同一款色譜柱，還有批次差異問題。但一般情況下，同一款色譜柱，批次差異都是比較小的。

02
儀器系統(tǒng)的排查

儀器系統(tǒng)的排查可以從以下幾個方面進行排查：

1）進樣量
確認樣品是否過載，進樣量不符合要求或者進樣時操作失誤，都可能導致色譜峰面積重現(xiàn)性差。如果是使用手動進樣器且方法要求進樣量小于定量環(huán)體積，必須使用合格的小體積進樣針完成進樣，且盡可能控制每次進樣體積一樣。如果是使用自動進樣器，需檢查進樣系統(tǒng)是否存在氣泡、樣品瓶是否裝得過滿、是否存在進樣針座堵塞或漏液等。

2 ）流動相

確認流動相是否新鮮配制的，比例有無錯誤。檢查溶劑瓶里的溶劑過濾器是否長菌，有沒有被堵塞。樣品與流動相起始比例不兼容，有的樣品組分在梯度起始流動相里可能析出，需要調(diào)整合適的流動相。

3 ）注射器

檢查注射器內(nèi)是否有氣泡，如果有氣泡，可以把注射器填充滿去除氣泡，或者使用脫氣溶劑。

4 ）核查檢測器參數(shù)
應核查檢測器的各項參數(shù)：比如UV檢測器的溫度（若設置溫度）是否穩(wěn)定，CAD檢測器的載氣流速、氣體壓力是否正常等。

03
方法的穩(wěn)定性問題
1）分析可離子化的化合物時，未在流動相中使用緩沖鹽，或鹽濃度不足。

2）流動相的pH與待分析物的pKa接近。

3）對流動相比例敏感，盡量使用同一臺儀器，或者流動相預混并記錄好具體混合方法，包括試劑的添加順序，甚至記錄量取時的試劑溫度。

4）緩沖溶液的pH須在加入有機相前進行調(diào)節(jié)。

04
結(jié)語

高效液相色譜方法重現(xiàn)性好是確保分析結(jié)果可靠性的關鍵因素?？梢酝ㄟ^色譜柱、儀器系統(tǒng)、方法本身的穩(wěn)定性這三方面去排查和優(yōu)化，有效提升HPLC色譜峰面積的重現(xiàn)性，為科研和生產(chǎn)提供更加準確、可靠的分析數(shù)據(jù)支持。