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你了解酶的提取和分離純化嗎?

欄目:行業(yè)資訊 發(fā)布時間:2021-07-05
與蛋白質(zhì)類似,酶易在溶液表面或界面處形成薄膜而變性,因此操作中應(yīng)盡量減少泡沫形成,此外重金屬易使酶失效,有機溶劑能使酶變性,微生物污染以及蛋白水解酶的存在能使酶分解破壞,那你了解酶的提取和分離純化嗎?

  與蛋白質(zhì)類似,酶易在溶液表面或界面處形成薄膜而變性,因此操作中應(yīng)盡量減少泡沫形成,此外重金屬易使酶失效,有機溶劑能使酶變性,微生物污染以及蛋白水解酶的存在能使酶分解破壞,那你了解酶的提取和分離純化嗎?

分離純化

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  許多酶都存在于細胞內(nèi)。為了提取這些胞內(nèi)酶,首先需要對細胞進行破碎處理。細胞破碎的方法很多,主要包括機械破碎法、物理破碎法、化學破碎法和酶學破碎法等。機械破碎法是指利用搗碎機、研磨器或勻漿器等將細胞破碎。物理破碎法是指利用溫度差、壓力差或超聲波等將細胞破碎。化學破碎法是指利用甲醛、丙酮等有機溶劑或表面活性劑作用于細胞膜,使細胞膜的結(jié)構(gòu)遭到破壞或透性發(fā)生改變。酶學破碎法是指選用合適的酶,使細胞壁遭到破壞,進而在低滲溶液中將原生質(zhì)體破碎。

  (二)提取

  酶的提取是指在一定條件下,用適當?shù)娜軇┨幚砑毎扑楹蟮暮冈?,使酶充分地溶解到提取液中的過程。酶的提取方法有過柱法、鹽溶液提取法、堿溶液提取法和有機溶劑提取法等。為了提高酶的提取率和防止酶提取后變性失活,提取過程中必須注意保持適宜的溫度和pH值,并且添加適量的保護劑。

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  提取液中含有多種酶,要想從提取液中分離純化出某一種酶,必須根據(jù)這種酶的特性,選擇合適的分離純化方法。酶分離純化的方法很多,可利用酶相對分子質(zhì)量的大小進行分離純化,如通過透析的方法分離酶等。