制備柱流速的分類和最佳設(shè)定。高效液相色譜把普通的色譜柱換成制備柱，就是制備液相色譜，兩者的區(qū)別在于一種以分析為目的，追求的是檢測精度，樣品承載量非常小。

　　一、制備柱流速的分類

　　1、制備色譜柱中的流速通常有兩種表述方式。

　　2、一種是體積流速，即單位時間內(nèi)流過某截面的流體的體積，單位mL/min，實(shí)際的分離過程中多用此來表示流體的速度；

　　3、另一種就是線流速，即流體中任一質(zhì)點(diǎn)在單位時間內(nèi)沿管路方向所通過的距離，單位cm/min，該表示方式多用于理論分析。

　　4、在分離純化過程中應(yīng)采用最佳流速以期得到最好的分離效果。最佳線流速從根本上是由填料粒徑和形狀所決定，而最佳體積流速可由最佳線流速與柱子內(nèi)徑的截面積相乘而得到。二者之間可通過色譜柱的內(nèi)徑互相換算。

　　二、制備柱流速的最佳設(shè)定

　　1、在快速制備分離的方法開發(fā)中，尤其是反相制備，往往需要借鑒高效液相色譜的方法。但是從高效液相的分析方法放大到制備液相的分離方法，許多參數(shù)都要做必要的修改。從分析到制備流速的放大，為了保證色譜峰的分離度基本維持不變，線流速往往是不變的。

　　2、在其他條件不變時，分析柱與制備柱最大的差異就是色譜柱的內(nèi)徑不同，一般來說分析柱內(nèi)徑為2~5mm，而制備柱的內(nèi)徑一般都大于10mm，此時兩者流速的比值約為色譜柱內(nèi)徑平方的比值，若分析柱內(nèi)徑為5mm時的最佳流速為1mL/min，那么內(nèi)徑為10mm制備柱相應(yīng)的最佳流速應(yīng)為4mL/min。

　　3、實(shí)際的制備分離中需要綜合考慮各種因素，有時為了成功進(jìn)行分離必須犧牲最佳柱效，因此很難達(dá)到理論上的最佳流速。當(dāng)分離效果不好時，我們要降低流速，低流速會由于縱向擴(kuò)散效應(yīng)而降低柱效進(jìn)而使峰型變差，但樣品分離效果相對較好；

　　當(dāng)分離效果很好時，通常會加大進(jìn)樣量，而且會相應(yīng)地增加流速，以加快出峰時間，提升分離效率，但過快地流速會產(chǎn)生較強(qiáng)的渦流擴(kuò)散效應(yīng)而讓柱效降低。制備色譜的填料顆粒一般較大，會導(dǎo)致裝柱的效果差，而傳質(zhì)阻力會相應(yīng)地大很多。受到這些因素的影響，實(shí)際上能達(dá)到的放大流速僅為理論值的40%~50%。

　　只要注意不超過柱子耐壓、保證足夠分離度、儀器本身可以做到、流速可以隨便提高。高流速還省時間呢。為了能夠延長制備柱的壽命，一般留些余量還是要的。