液相色譜柱能夠反沖?
這是很多用液相色譜技術(shù)人員的一個(gè)疑問。
看到有小伙伴說,如果色譜柱柱頭堵了,壓力升高了,反沖完的效果也不錯(cuò)。
也有小伙伴說,廠家說不建議反沖,沖了會(huì)影響柱效?。。?/span>
那么,今天我們就來分析討論一下!色譜柱到底能不能反沖,以及背后的原因是什么?
當(dāng)色譜圖峰型變差或儀器壓力過高時(shí),我們會(huì)使用不同溶劑對(duì)色譜柱進(jìn)行反向沖洗,雖然看到了一些改進(jìn),但效果并不穩(wěn)定。我們?cè)撊绾胃倪M(jìn)呢?答:作為色譜柱生產(chǎn)廠家,小研并不提倡反向沖柱。大多數(shù)情況下,反向沖柱并不起作用,而當(dāng)我們認(rèn)為它起作用時(shí),也可以通過更合理的方式來改善。什么情況下我們需要嘗試對(duì)色譜柱反向沖洗?原因可能有:由于流動(dòng)相或 HPLC 儀器中的樣品成分或碎屑堆積在柱頭導(dǎo)致的壓力升高、色譜柱性能顯著下降。如果碎屑足夠多,就會(huì)聚集在色譜柱過濾片的外表面,導(dǎo)致過濾片損壞,這種情況下,更換過濾片與反向沖洗的效果是一樣的。不過,根據(jù)小研的經(jīng)驗(yàn),過濾片損壞的問題是比較少發(fā)生的,一般是色譜柱柱頭被污染物污染并吸附堵塞,導(dǎo)致色譜柱壓力升高。當(dāng)污染物分子量較大或溶解度較低時(shí),會(huì)堵塞色譜柱內(nèi)填料之間的通道,而第一層填料受到污染物的作用力最大,填料層被擠壓重新排列、變形,甚至塌陷,最終導(dǎo)致峰形惡化。要修復(fù)這種填料結(jié)構(gòu)內(nèi)部的損壞是非常困難的,甚至是不可能的,反向沖洗色譜柱充其量只是一場(chǎng)賭博。反向沖洗可能不是一個(gè)很好的解決方案,但確實(shí)有幫助,至少可以讓色譜柱的壽命更長(zhǎng)一些?答:反沖色譜柱有一點(diǎn)幫助但不多,小研喜歡更可靠、更持久的解決方案——保護(hù)柱。保護(hù)柱通常是指安裝在進(jìn)樣器和分析柱之間的小短柱,通過預(yù)先捕集能被分析柱牢固吸附,不能被流動(dòng)相所洗脫的物質(zhì),保護(hù)并延長(zhǎng)分析柱使用壽命。保護(hù)柱就像是疫情期間必備的口罩,把病毒阻擋在人體外面,流動(dòng)相和樣品里如有什么損害柱子的污染物,保護(hù)柱就自己承受,不會(huì)讓其進(jìn)入分析柱。市場(chǎng)上有許多不同的保護(hù)柱。我應(yīng)該使用哪一種?
答:保護(hù)柱很重要,但選擇合適的保護(hù)柱更重要,選擇或使用不當(dāng)也可能帶來截然相反的效果。保護(hù)柱的填料,要與分析柱保持一致!填料品牌一致,才能100%確保選擇性一致。此外,保護(hù)柱的規(guī)格,要與分析柱匹配!填料粒徑一致,保護(hù)柱的內(nèi)徑與分析柱的內(nèi)徑相近。對(duì)于精細(xì)分離,保護(hù)柱本身的裝填柱效要足夠好!保護(hù)柱建議專柱專用,避免保護(hù)柱成為不同項(xiàng)目的交叉污染源。當(dāng)峰的理論塔板數(shù)下降15%,或是柱壓上升15%,或是關(guān)鍵分離度下降15%時(shí),都應(yīng)該及時(shí)更換保護(hù)柱。廣州研創(chuàng)推出手性及常規(guī)系列色譜柱的“保護(hù)傘”——保護(hù)柱!歡迎聯(lián)系訂購(gòu)18922204815 / 020-32051815
手性色譜柱嬌貴,需要嚴(yán)格按照說明書使用,反沖是不建議的!知其然、知其所以然、知其所以必然。今日小研分享的知識(shí)就先到這啦,希望能對(duì)你們有所幫助!