在使用通用型反相色譜柱之前,應(yīng)對其性能進行測試并保存結(jié)果,以便今后參考柱性能變化。但需要注意的是,液相色譜柱的性能可能因樣品、流動相和柱溫等條件的差異而有所不同。此外,性能測試應(yīng)根據(jù)色譜柱出廠報告中的條件進行,因為這是出廠測試所采用的標(biāo)準(zhǔn)條件,只有這樣,才能確保測試結(jié)果的可比性。
樣品的預(yù)處理:
a、采用活性相溶液樣品。
b、使用預(yù)處理柱去除樣品中強極性雜質(zhì)或與柱填料發(fā)生不可逆吸附的物質(zhì)。
c、使用0.45μm的過濾膜來去除微小的顆粒雜質(zhì)。
通用反相色譜柱的維護方法
在使用通用型反相色譜柱之前,應(yīng)對其性能進行測試,并將結(jié)果保存,以便作為評估柱性能變化的參考。
請注意:柱子的性能可能會因為樣品類型、流動相、柱溫等條件的不同而有所變化。此外,在進行柱性能測試時,應(yīng)按照色譜柱出廠報告中的條件進行(出廠測試所用的條件是*條件),只有這樣才能確保結(jié)果具備可比性。在對色譜柱使用前進行測試后,應(yīng)根據(jù)具體情況對色譜柱進行適當(dāng)?shù)木S護。
通用型反相色譜柱在每天實驗后需進行保養(yǎng):在使用緩沖液或含鹽的流動相后,實驗結(jié)束時需用10%的甲醇/水溶液沖洗30分鐘,以去除色譜柱中的鹽分,然后再用甲醇沖洗30分鐘。
請注意:不可用純水沖洗柱子,應(yīng)在水中添加10%的甲醇,以防止填料塌陷。
色譜柱的長期保存:若需長期保存色譜柱,必須置于適當(dāng)?shù)娜軇┲小τ诜聪嗌V柱,可以使用純甲醇或乙腈進行儲存;針對正相色譜柱,應(yīng)選擇嚴(yán)格脫水的純正己烷;而離子交換色譜柱則可保存在含有防腐劑(如柳硫汞)的水中,且需使用隨新色譜柱附帶的堵頭封閉。儲存溫度應(yīng)保持在室溫。
除了上述的日常保養(yǎng)與長期保存措施外,定期檢查和評估色譜柱的狀態(tài)也是不可或缺的環(huán)節(jié)。每完成一定數(shù)量的樣品分析后,應(yīng)評估色譜柱的分辨率、柱效及基線穩(wěn)定性等關(guān)鍵性能指標(biāo),以便及時發(fā)現(xiàn)并解決潛在問題。若發(fā)現(xiàn)色譜峰拖尾、柱壓升高或分離度明顯下降,可能是柱內(nèi)污染或填料降解的跡象,此時應(yīng)考慮進行更深入的清洗或再生處理。
對于深度清洗,可選用適合色譜柱填料的強溶劑體系,如含有低濃度有機酸的溶液,通過增加清洗液的溶解能力和減少吸附效應(yīng)來去除頑固的污染物。但需注意,過強的溶劑可能會損害柱填料,因此選擇和使用時需謹(jǐn)慎。
此外,還應(yīng)重視色譜柱使用的環(huán)境條件,如溫度波動、濕度以及直接暴露于光照和空氣中的情況,這些都可能對色譜柱的穩(wěn)定性和性能產(chǎn)生影響。建議在實驗室內(nèi)安裝溫濕度控制系統(tǒng),并保持環(huán)境整潔,以減少外部因素對色譜柱的負(fù)面影響。
最后,記錄每次維護的細(xì)節(jié)和結(jié)果,包括清洗方法、溶劑種類、時間、以及處理前后的性能對比等,這對于優(yōu)化色譜柱使用策略、延長其使用壽命以及未來的問題排查都具有重要意義。通過這些細(xì)致的維護工作,我們可以確保通用型反相色譜柱始終保持最佳狀態(tài),為實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性提供堅實保障。