對于一種手性化合物,因為其存在對映異構體,而一對手性對映體的理化性質雖然極為相似,但生物活性往往不盡相同,有時還會表現(xiàn)出相反的作用,例如S-2-異丙草胺能除草,而其R型的對映異構體不僅不能除草還會導致突變;抗炎、解熱、鎮(zhèn)痛藥物萘普生的S構型的藥效是R構型的28倍。隨著手性拆分技術以及不對稱合成技術的日益成熟,手性藥物的研究已成為新藥研究的一大熱點。
為了得到手性化合物中的其中一種構型,其中色譜分離法能更方便、高效地將其分離出來。
對于色譜分離,一般有HPLC和SFC兩種方法,通過不同的體系搭配專用的手性色譜柱將目標產物分離出來,這其中就涉及到手性化合物的方法開發(fā)。
對于一種手性化合物,開發(fā)一種新的拆分方法,會涉及到很多方面,選擇哪種體系(HPLC/SFC)?色譜柱?流動相?都要考慮進去。
就目前而言,SFC體系是拆分手性化合物的首選,其相對于HPLC體系而言有更好的選擇性和分離效果,同時也更高效,因為SFC體系采用的是超臨界流體CO2和有機試劑,搭配手性色譜柱,對手性化合物有很強的的選擇性和分離效果。
對于SFC體系,因為其采用的是超臨界CO2和有機試劑(改性劑)作為流動相,所以想要開發(fā)出合適的分離方法,其中要考慮到改性劑的選擇、手性色譜柱的選擇、溫度的控制、添加劑的選擇。
對于改性劑的選擇:甲醇、乙醇、異丙醇、乙腈是常用的改性劑,其中還要注意CO2和改性劑的使用比例,改性劑比例提高,出峰時間也會提前。有時也會使用上訴幾種溶劑的混和作為改性劑。
對于色譜柱的選擇:手性色譜柱相對于其他C18等色譜柱而言,價格昂貴,但是其對手性化合物的分離有很強的選擇性,目前一般有兩種類型:涂敷型和鍵合型,其中的四大金剛柱可以將80%以上的手性化合物進行分離,剩余的可以用其他手性色譜柱進行嘗試。